什么是抗酸染色分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，所以分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性脱色剂脱色，故名抗酸染色。最具代表性的萋-尼氏（Ziehl－Neelsen）抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物，用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色，（如图）。抗酸染色一般步骤1）初染用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸，加热3-5分钟，待标本冷却后用水冲洗。2）脱色3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟，用水冲洗。3）复染用碱性美兰溶液复染1分钟，水洗，用吸水纸吸干后用油镜观察。抗酸染色的报告方法1）抗酸杆菌阴性:连续观察个不同视野，未发现抗酸杆菌；2）报告抗酸杆菌数:1~8条抗酸杆菌/个视野，连续观察个不同视野；3）抗酸杆菌阳性（1+）:3~9条抗酸杆菌/个视野，连续观察个不同视野；4）抗酸杆菌阳性（2+）:1~9条抗酸杆菌/10个视野，连续观察个不同视野；5）抗酸杆菌阳性（3+）:1~9条抗酸杆菌/每个视野；6）抗酸杆菌阳性（4+）:≥10条抗酸杆菌/每个视野。抗酸染色结果的临床意义抗酸染色可作为分枝杆菌病原学检测手段，但分枝杆菌种类较多，可分为结核分枝杆菌复合群、非结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌三类。因此抗酸染色“阳性”，仅仅提示有分枝杆菌感染，并不一定是结核菌感染，也可能是鸟分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌等。特别指出，非结核分枝杆菌（NTM）感染率逐年上升，而且以肺病最常见，也可以引起播散性病变、淋巴结病变、皮肤软组织和骨病等。常见引起肺病的NTM包括鸟分枝杆菌复合群、脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌，常见引起播散性病变的NTM多为鸟分枝杆菌，引起淋巴结病变的NTM多为鸟分枝杆菌复合群，几乎所有的NTM都可以引起皮肤、软组织和骨关节病变，但以快生长分枝杆菌、海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌最常见。因此不能只凭借抗酸染色“阳性”结果来诊断结核菌感染，NTM不能忽略。抗酸染色“阴性”也不一定绝对没有检测到，要从痰液或支气管分泌物中发现分枝杆菌需要一定条件，就是患者肺部的感染灶与支气管相通，就是所说的肺部有开放性空洞，只有这样病灶中的菌才能被患者咳出至痰液中，如果是结核瘤、或病灶封闭局限，痰液或支气管分泌物中是不会出现分枝杆菌的，此外，肺部以外的部位发生结核菌感染，如泌尿系结核、腹腔结核等也是不能从呼吸道分泌物中查出分枝杆菌的。因此，在分析抗酸染色结果时，应结合患者的临床症状以及其它检查如影像学结果综合判断。
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